如何对植物病害进行标本采集和鉴定

网上有关“如何对植物病害进行标本采集和鉴定”话题很是火热,小编也是针对如何对植物病害进行标本采集和鉴定寻找了一些与之相关的一些信息进行分析,如果能碰巧解决你现在面临的问题,希望能够帮助到您。

通过采集和制作标本,了解植物病害标本采集要求,学会标本的采集与记录,掌握植物病害标本的制作方法,进一步巩固病害知识,每人抽签完成1份病害标本。

材料和用具 标本夹、吸水纸、塑料袋、纸袋、标签、铅笔、记号笔、小刀、枝剪、手锯、标本缸、酵酸铜、硫酸铜、95%乙醇、甲醛溶液、亚硫酸、甘油、蒸馏水等。

内容与方法

(一) 病害标本的采集

1 标本采集基本要求

采集完整的标本,最好是先摄影然后再压制或浸渍保存,拍照越清晰越好,要求拍正常植株和病害部位。每号标本,样本数量应至少采集2-3份。

2 取样部位

(1)标本上有子实体的应尽量在老叶上采集

因为它比较成熟,许多真菌有性阶段的子实体都在枯死的枝叶上出现,而无性阶段子实体大多在活体上可以找到。

(2)柔软多汁的子实体或果实材料,则应采集新发病的幼果。

(3)病毒病应尽量采集顶梢与新叶。

(4)线虫病害标本应采病变组织,为害根部的线虫病害标本除采集病根外还应采集根围土壤。

(5)表现蔫萎的植株要连根挖出,有时还要连同根际的土壤等一同采集。

(6)对于粗大的树枝和植株,则宜削取一片或割取一截。

(7)如果病害在叶、果实和枝干上都有表现时,尽量采集全面。

(8)寄生类应和寄主一起采集。病害症状很特殊病害,要连同植株的枝叶或花一起采集,以便鉴、定其寄主名称。

3 标本数据记录和标本编号

要求记录准确、简要、完整。完整的记录与标签同样十分重要,要有寄主名称、

采集日期与地点、采集者姓名、生态条件和土壤条件等。

4 标本采集 方法

(1)枝干类、根部病害标本的采集

取其得病部位,用锯、枝剪或高枝剪采取,切勿用手折断,影响标本的美观,对纤维长而强韧的枝干等,尤应注意。

(2) 叶部病害标本的采集

大型叶植物,它们的叶子和花序均很大,采集标本时可采一部分或分段采集,以同株上幼小叶加上花果组成一份标本(同时标明叶实际大小);或把叶、叶柄各自分段取其一部分;

对于像菟丝子、列当这样的寄生植物应连同寄主一起采集,并记录寄主的名称。 (3)肉质或多汁植物(花、果实)病害标本的采集

应将其纵切或横切,有时需将其内部的组织挖出,还要考虑是否将一半的材料浸泡在保存液中保存。在野外干燥时,要在切开的茎表面洒大量食盐,用盐包裹的材料应置于夹有多层报纸的标本夹中,24小时后要把浸有盐水的报纸移去,或者用开水将材料烫死,然后放置在薄纸板-铝板的三明治层中烘干。

(二)病害标本的制作

从田间采回的标本,除一部分用作分离鉴定外,对于典型的病害症状最好是先摄影然后再压制或浸渍保存。压制或浸渍的标本尽可能保持其原有性状,微小的标本可以制成玻片,如双层玻片、凹穴玻片或用其它小玻管小袋收藏。

(三) 病害标本的保存

1 干燥法 适用于一般含水较少的茎、叶等病害标本的制作,最简单、最经济、应用最广。 将采集的标本夹在吸水纸中,同时放入写有采集地点、日期和寄主名称的标签,再用标本夹压紧后日晒或加温烘烤,使其干燥,干燥愈快愈能保持原有的色泽,标本质量亦愈高。夏季采的标本在温湿度高的情况下,容易发霉变色,换纸宜勤,通常在压制的最初三、四天每天换纸l-2次(视标本含水多少,及温湿度情况而定),以后每二、三天换一次,至完全干燥为止。在第一次换纸的同时,应将标本加以整理,因经初步干燥,标本变软易于铺展。烟草、蚕豆、梨、马铃薯的茎叶等很易发黑变色,都是很难保存颜色的标本,在制作过程中特别要注意快速干燥。需要保持绿色的干制标本,可先将标本在2-4%硫酸铜溶液中浸24小时,或经过醋酸铜溶液(配方及方法见浸渍法中醋酸铜的浸渍法)处理后再压制。也可以在叶面抹一层液体石蜡后再压,可以保持鲜绿色2-3天。

2 浸渍法 适用于 多汁的病害标本,

如果实、块根或担子菌的子实体等,必须用浸渍法保存。浸渍液体种类很多,有纯属防腐性的,亦兼有保持标本原色的,现介绍数种常用及效果较好的方法。

(1)防腐浸渍法:此类浸渍法仅能防腐而没有保色作用,如萝卜、甘薯等,不要求保色的标本,洗净后直接浸于以下溶液中。 ①5%福尔马林浸渍液。

②亚硫酸浸渍液:l000ml水中加5%-6%亚硫酸15ml(一般市售的亚硫酸含量为5— 6%)或用亚硫酸钠10.5g,浓硫酸8ml,水500ml配成混合液。

(2)保持绿色标本的浸渍液及浸泡法:

①醋酸铜保(绿)色浸渍法:往50%的醋酸中逐渐加入醋酸铜结晶溶解至饱和作为母 液(大约1000ml50%的醋酸中加入l5g醋酸铜即可达饱和),使用时兑水稀释1-4倍(稀 释倍数视标本颜色而异,色深者稀释倍数可小些)。将此液加热煮沸,投入标本,开始时标本的绿色被漂去,再经数分钟后标本又恢复绿色,此时立即将标本取出,用清水洗净,保存于5%的福尔马林溶液中,此法称为热处理。冷处理的办法是将标本置于上述稀释液中浸3小时后标本退色,再经72小时后标本恢复绿色,此时将标本取出,取水冲净,保存于5%的福尔马林溶液中。此法保持色泽时间较长,其保色原理大致是铜离子与叶绿素中的镁离子发生置换作用。所以,溶液经多次处理标本后,铜离子会逐渐减少。如要继续使用,应补入适量的醋酸铜。此法保存标本往往略带蓝色,与植物标本原色稍有出入。

②硫酸铜保(绿)色浸渍法:用清水冲洗标本,直接浸泡在5%的硫酸铜溶液中1—7天,待标本略带褐色时取出用清水漂洗,去除标本表面多余的硫酸铜溶液,然后保存在亚硫酸浸渍液中。

③保存**和桔红色标本的浸渍液:保存杏、梨、柿、红辣椒等果实标本用亚硫酸浸

渍液,亚硫酸浸渍液有漂白作用,因此使用时要注意浓度,一般用1 %即可(浸杏时浓度可再稀些),因浓度太小,防腐力不够,可加入适量酒精。为了防止果实崩裂,可加入少许甘油。

④保存红色标本的浸渍液:保存标本红色较难,因为红色是水溶性的花青素,很难保存。常用Hesler浸渍液保存,成分是:氯化锌50g,福尔马林25ml,甘油25ml,水1000ml。 将氯化锌溶于热水中,加入福尔马林,如有沉淀,用其澄清液。此溶液适用于由于花青素 而显红色的标本,如苹果、番茄等。

(四) 标本的保存

制成的标本,经过整理和登记,然后依一定的系统排列和保藏。

菌类标本一般按分类系统排列,要有两套索引卡片,一套是寄主索引,一套是菌类索引,以便于寻拽和整理。

标本室(柜)要保持干燥、潸浩,并要定期施药以防虫蛀与霉变。

1 标本盒保藏 教学和示范用的干制病害标本,采用玻面纸盒保藏比较方便,玻面纸盒,的适宜大小为20×28×2 cm。纸盒中先铺一层棉花,并在棉花中加少许樟脑粉以驱虫。最后在棉花上放上标本和标签。

2 标本瓶保藏 浸渍的标本放在标本瓶内保藏,为了防止标本下沉和上浮,可绑在玻璃条上然后再放入标本瓶。标本瓶的口盖好后滴加石蜡封口,然后贴上标签。

3 纸套内保藏 用牛皮纸叠成15×33cm的纸套,大量保存的干制标本,大多采用纸套保藏,将标本装入纸套内,并在纸套上贴好标签,放在标本柜中即可。

植物叶子制作玻片标本方法

首先植物叶子制作玻片标本,根据植物的切面来说分大致三种:横切面,冠状面,矢状面。主要的思路都是得到植物叶子需要观察的主茎,脉络等地方的细胞层来进行观察。

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工具材料:

载玻片,盖玻片

新鲜叶片

双面刀片

盛有清水的培养皿

胶头滴管,吸水纸,纱布,镊子,毛笔

操作方法

01

1. 选取叶片:一定要选择一片新鲜的叶片,一般教材书上会说用菠菜叶子,用什么叶子其实都可以,但是最好是新鲜的叶子。将新鲜的叶片,平放在载玻片上,用刀片去除叶片的基部、页面尖端以及叶片的两端,留下中间含有主脉长方形小叶片

02

切取植物材料:因为我们这里是横截面,可以用镊子按压材料一端,右手捏紧刀片,沿着主叶脉垂直方向切割叶片,每切一次刀片粘一下水,将薄薄的切下的叶片放入盛有清水的培养皿中

03

选材制片:用镊子从水中选取最薄的切片,首先在载玻片上可以滴你需要染色的材料,然后将薄薄的叶子切面放平展开,盖上载玻片。还记得洋葱组织怎么提取的吗?都是通过撕取洋葱表皮得到薄薄的外皮。

04

观察:观察完整清晰的叶片的横切面结构。遵循从整体到局部,先小倍数找到细胞位于哪个部位,然后通过局部放大调整亮度和倍数得到较好的视野与清晰度。猜猜这些分别是什么类型的细胞?

05

清洗:洗净载玻片与培养皿,还原器材,将废物放入指定容器,养成良好的实验好习惯

特别提示

使用刀片时候要注意安全

盖上载玻片多操作思考,想想怎么样能够没有气泡

获取薄薄的植物组织细胞方法有很多种,常用的都是撕,就像动物组织刮类似

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011. 选取叶片:一定要选择一片新鲜的叶片,一般教材书上会说用菠菜叶子,用什么叶子其实都可以,但是最好是新鲜的叶子。将新鲜的叶片,平放在载玻片上,用刀片去除叶片的基部、页面尖端以及叶片的两端,留下中间含有主脉长方形小叶片

02切取植物材料:因为我们这里是横截面,可以用镊子按压材料一端,右手捏紧刀片,沿着主叶脉垂直方向切割叶片,每切一次刀片粘一下水,将薄薄的切下的叶片放入盛有清水的培养皿中

03选材制片:用镊子从水中选取最薄的切片,首先在载玻片上可以滴你需要染色的材料,然后将薄薄的叶子切面放平展开,盖上载玻片。还记得洋葱组织怎么提取的吗?都是通过撕取洋葱表皮得到薄薄的外皮。

04观察:观察完整清晰的叶片的横切面结构。遵循从整体到局部,先小倍数找到细胞位于哪个部位,然后通过局部放大调整亮度和倍数得到较好的视野与清晰度。猜猜这些分别是什么类型的细胞?

05清洗:洗净载玻片与培养皿,还原器材,将废物放入指定容器,养成良好的实验好习惯

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